journal6 ›› 2007, Vol. 28 ›› Issue (1): 95-97.

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极度濒危植物猪血木RAPD反应体系的优化

  

  1. (1.广东化工制药职业技术学院,广东 广州 510520;2.中山大学生命科学学院,广东 广州 510275)
  • 出版日期:2007-01-25 发布日期:2012-06-19
  • 通讯作者: 苏应娟,通讯作者,ls97@zsu.edu.cn.
  • 作者简介:欧阳蒲月(1978-),女,湖南邵阳人,硕士,主要从事药用植物资源和药用植物分子生物学研究.
  • 基金资助:

    国家自然科学基金资助项目(30271094)

Optimal Choice for Reaction System in RAPD Analysis of Euryodendron Excelsum H.T.Chang

  1. (1.Guangdong Vocational & Technical College of Pharmaceutical Engineering,Guangzhou 510520,China;2.School of Life Sciences,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510275,China)
  • Online:2007-01-25 Published:2012-06-19

摘要:采用改进的CTAB法提取中国特有极度濒危植物猪血木(Euryodendron excelsum H.T.Chang) 嫩叶总DNA,并对其进行RAPD分析.分别检测了模板DNA、引物、dNTP、Mg2+和Taq DNA聚合酶用量对反应结果的影响.筛选并建立了适合于猪血木RAPD扩增的反应体系:总体积25 μL,其中10×PCR 缓冲液(500 mmol/L KCl,100 mmol/L Tris-HCl,110% Triton X-100,20 mmol/L MgCl2) 2.5 μL,引物( 1.5 μmol/L) 0.3 μL,dNTPs (10 mmol/L) 0.5 μL,模板2 μL (25 ng),Taq 酶0.2 μL (0.5 U).

关键词: 猪血木(Euryodendron excelsum H.T.Chang), RAPD, 反应体系, 优化

Abstract: The DNA templates of Euryodendron excelsum H.T.Chang extracted from young leaf were amplified by RAPD.Effects of the content of DNA temlates,primers,dNTP,Mg2+ and Taq DNA polymerase on experimental results were tested and the optimal reaction system of RAPD for Euryodendron excelsum H.T.Chang was determined as follows:25 ng DNA template,2.0 mmol/L Mg2+,0.018 μmol/L primer,250 μmol/L dNTP,0.5 u Taq DNA polymerase in total 25 μL reaction volume.

Key words: Euryodendron excelsum H.T.Chang, RAPD, reaction system, optimal choice

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